Golgi'nin yöntemi - Golgi's method

Camillo Golgi'nin gümüş nitrat yöntemiyle boyanmış bir hipokampüs çizimi
Bir çizimi Purkinje hücresine içinde Beyincik korteksin Santiago Ramón y Cajal tarafından yapılan, açıkça Golgi en boyama yönteminin gücünü gösteren ince ayrıntıları ortaya çıkarmak için
Golgi tekniği ile boyanmış bir insan neokortikal piramidal nöron . Soma üzerinde dikey olarak uzanan apikal dendrit ve hücre gövdesinin tabanından yanal olarak yayılan çok sayıda bazal dendrit dikkat edin.

Golgi'nin yöntemi , sinir dokusunu ışık mikroskobu altında görselleştirmek için kullanılan bir gümüş boyama tekniğidir . Yöntem tarafından keşfedildi Camillo Golgi , bir İtalyan doktor ve bilim adamı Başlangıçta seçildi 1873 yılında tekniğiyle yapılan ilk resmi yayınlandı, siyah reaksiyon ( la reazione nera Golgi tarafından), ama daha iyi Golgi leke olarak tanındı veya daha sonra Golgi yöntemi.

Golgi boyaması, İspanyol nöroanatomist Santiago Ramón y Cajal (1852–1934) tarafından sinir sisteminin organizasyonu hakkında bir dizi yeni gerçekleri keşfetmek için kullanıldı ve nöron doktrininin doğuşuna ilham verdi . Nihayetinde Ramón y Cajal, "çift emprenye" ​​olarak adlandırdığı bir yöntemi kullanarak tekniği geliştirdi. Hala kullanımda olan Ramón y Cajal boyama tekniğine Cajal Boyası denir.

Mekanizma

Sinir dokusundaki hücreler yoğun bir şekilde paketlenmiştir ve tüm hücreler boyanırsa yapıları ve ara bağlantıları hakkında çok az bilgi elde edilebilir. Dahası, nöronların akson ve dendritleri de dahil olmak üzere nöral hücrelerin ince ipliksi uzantıları, normal boyama teknikleriyle görülemeyecek kadar ince ve şeffaftır. Golgi'nin yöntemi, sınırlı sayıda hücreyi tamamen rastgele boyar. Bunun meydana geldiği mekanizma hala büyük ölçüde bilinmemektedir. Dendritler ve hücre soma açık bir şekilde kahverengi ve siyah renkte boyanır ve tüm uzunlukları boyunca izlenebilir, bu da nöroanatomistlerin nöronlar arasındaki bağlantıları izlemesine ve beynin ve omuriliğin birçok bölümünün karmaşık ağ yapısını görünür hale getirmesine izin verir. .

Golgi'nin boyaması, aldehit ile sabitlenmiş sinir dokusunun potasyum dikromat ve gümüş nitrat ile emprenye edilmesiyle elde edilir . Bu şekilde boyanan hücreler , gümüş kromatın mikrokristalizasyonu ile doldurulur .

Teknik

SynapseWeb'e göre, bu Golgi'nin boyama tekniğinin tarifi:

  1. Bir bloğu (yaklaşık 10x5 mm) formaldehit ile sabitlenmiş (veya paraformaldehit - glutaraldehit -perfüzyonlu) beyin dokusunu 2 gün boyunca % 2 sulu potasyum dikromat çözeltisine daldırın
  2. Bloğu filtre kağıdı ile kısa süre kurutun .
  3. Bloğu 2 gün daha% 2 sulu gümüş nitrat çözeltisine daldırın.
  4. Yaklaşık bölümleri kesin. 20–100  µm kalınlığında.
  5. Etanol içinde hızla dehidre edin, temizleyin ve monte edin (örn. Depex veya Enthalan içine).

Bu teknik o zamandan beri gümüş çökeltisini altınla ikame etmek için numuneyi altın klorüre ve ardından oksalik aside batırmak ve ardından gümüşün sodyum tiyosülfat ile çıkarılmasıyla rafine edilmiştir . Bu, küçük altın parçacıklarıyla işaretlenmiş ultra yapısal ayrıntılarla daha yüksek derecede ince yapıyı korur.

Alıntı

Ramón y Cajal Golgi yöntemi hakkında şunları söyledi:

Krom-gümüş reaksiyonunun müthiş açığa çıkarıcı güçlerini ve keşfiyle uyandırılan bilim dünyasında hiçbir heyecanın olmamasını kendi gözlerimle görünce yaşadığım şaşkınlığı dile getirdim.
Recuerdos de mi vida, Vol. 2, Historia de mi labour científica . Madrid: Moya, 1917, s. 76.

Referanslar

Dış bağlantılar