Golgi'nin yöntemi - Golgi's method
Golgi'nin yöntemi , sinir dokusunu ışık mikroskobu altında görselleştirmek için kullanılan bir gümüş boyama tekniğidir . Yöntem tarafından keşfedildi Camillo Golgi , bir İtalyan doktor ve bilim adamı Başlangıçta seçildi 1873 yılında tekniğiyle yapılan ilk resmi yayınlandı, siyah reaksiyon ( la reazione nera Golgi tarafından), ama daha iyi Golgi leke olarak tanındı veya daha sonra Golgi yöntemi.
Golgi boyaması, İspanyol nöroanatomist Santiago Ramón y Cajal (1852–1934) tarafından sinir sisteminin organizasyonu hakkında bir dizi yeni gerçekleri keşfetmek için kullanıldı ve nöron doktrininin doğuşuna ilham verdi . Nihayetinde Ramón y Cajal, "çift emprenye" olarak adlandırdığı bir yöntemi kullanarak tekniği geliştirdi. Hala kullanımda olan Ramón y Cajal boyama tekniğine Cajal Boyası denir.
Mekanizma
Sinir dokusundaki hücreler yoğun bir şekilde paketlenmiştir ve tüm hücreler boyanırsa yapıları ve ara bağlantıları hakkında çok az bilgi elde edilebilir. Dahası, nöronların akson ve dendritleri de dahil olmak üzere nöral hücrelerin ince ipliksi uzantıları, normal boyama teknikleriyle görülemeyecek kadar ince ve şeffaftır. Golgi'nin yöntemi, sınırlı sayıda hücreyi tamamen rastgele boyar. Bunun meydana geldiği mekanizma hala büyük ölçüde bilinmemektedir. Dendritler ve hücre soma açık bir şekilde kahverengi ve siyah renkte boyanır ve tüm uzunlukları boyunca izlenebilir, bu da nöroanatomistlerin nöronlar arasındaki bağlantıları izlemesine ve beynin ve omuriliğin birçok bölümünün karmaşık ağ yapısını görünür hale getirmesine izin verir. .
Golgi'nin boyaması, aldehit ile sabitlenmiş sinir dokusunun potasyum dikromat ve gümüş nitrat ile emprenye edilmesiyle elde edilir . Bu şekilde boyanan hücreler , gümüş kromatın mikrokristalizasyonu ile doldurulur .
Teknik
SynapseWeb'e göre, bu Golgi'nin boyama tekniğinin tarifi:
- Bir bloğu (yaklaşık 10x5 mm) formaldehit ile sabitlenmiş (veya paraformaldehit - glutaraldehit -perfüzyonlu) beyin dokusunu 2 gün boyunca % 2 sulu potasyum dikromat çözeltisine daldırın
- Bloğu filtre kağıdı ile kısa süre kurutun .
- Bloğu 2 gün daha% 2 sulu gümüş nitrat çözeltisine daldırın.
- Yaklaşık bölümleri kesin. 20–100 µm kalınlığında.
- Etanol içinde hızla dehidre edin, temizleyin ve monte edin (örn. Depex veya Enthalan içine).
Bu teknik o zamandan beri gümüş çökeltisini altınla ikame etmek için numuneyi altın klorüre ve ardından oksalik aside batırmak ve ardından gümüşün sodyum tiyosülfat ile çıkarılmasıyla rafine edilmiştir . Bu, küçük altın parçacıklarıyla işaretlenmiş ultra yapısal ayrıntılarla daha yüksek derecede ince yapıyı korur.
Alıntı
Ramón y Cajal Golgi yöntemi hakkında şunları söyledi:
- Krom-gümüş reaksiyonunun müthiş açığa çıkarıcı güçlerini ve keşfiyle uyandırılan bilim dünyasında hiçbir heyecanın olmamasını kendi gözlerimle görünce yaşadığım şaşkınlığı dile getirdim.
- Recuerdos de mi vida, Vol. 2, Historia de mi labour científica . Madrid: Moya, 1917, s. 76.
Referanslar
Dış bağlantılar
- Golgi'ler ile boyanmış bir korteks hücresinin fotomikrografı . IHC Resim Galerisi.
- Golgi emprenyeleri . Sineklerin beyninin görüntüleri.
- Golgi Yöntemi kullanılarak dendritik dikenlerin görselleştirilmesi . SynapseWeb. Golgi emdirme ile ilgili hızlandırılmış bir çalışma içerir.
- Berrebi Albert: Nöronların Hücre Biyolojisi: Yapı ve Çalışma Yöntemleri . (PDF olarak)
- "Golgi lekeli nöronları" include lekeli beyin dilim görüntüleri de BrainMaps projesi