Radioimmunoassay - Radioimmunoassay

Radioimmunoassay
MeSH D011863

Bir radyo- ( RIA ) bir bir bağışıklık kullanımları bu radyoaktif bir adım adım oluşumu moleküllerinin bağışıklık kompleksleri . Bir RIA, bir çok hassastır in vitro genellikle ölçme maddelerin konsantrasyonlarını ölçmek için kullanılan deney tekniği antijen konsantrasyonları (örneğin, hormon düzeyleri , kan ) kullanımı ile antikor .

DEA tekniği son derece hassas ve son derece spesifik olmasına ve özel ekipman gerektirmesine rağmen, bu tür ölçümleri gerçekleştirmek için en ucuz yöntemler arasında kalmaktadır. Radyoaktif maddeler kullanıldığından özel önlemler ve ruhsat gerektirir.

Bunun tersine, bir immünoradyometrik test (IRMA), radyo etiketli molekülleri kullanan, ancak adım adım yerine anında kullanan bir immüno testtir .

Bir radyoallergosorbent testi (RAST), bir radyoimünoassay örneğidir. Etkenle algılamak için kullanılan allerjen bir için alerji .

Yöntem

Klasik olarak, bir radyoimünodeney gerçekleştirmek için, bilinen miktarda bir antijen , tirozine bağlı 125-I gibi gama-radyoaktif iyot izotopları ile etiketlenerek radyoaktif hale getirilir . Bu radyo-etiketli antijen daha sonra bu antijen için bilinen miktarda antikor ile karıştırılır ve sonuç olarak ikisi spesifik olarak birbirine bağlanır. Daha sonra, aynı antijeni bilinmeyen miktarda içeren bir hastadan alınan bir serum örneği eklenir. Bu, serumdan gelen etiketlenmemiş (veya "soğuk") antijenin, antikor bağlanma bölgeleri için radyo etiketli antijen ("sıcak") ile rekabet etmesine neden olur. Olarak konsantrasyonu , "soğuk" antijen artar, daha fazla bunun radyo-etiketli bir varyantı yer değiştirmesi ve serbest radyo-etiketli antijen için antikor bağlı radyo-etiketli antijen oranını azaltarak antikora bağlanır. Bağlanmış antijenler daha sonra ayrılır ve süpernatanda kalan serbest (bağlanmamış) antijenin radyoaktivitesi bir gama sayacı kullanılarak ölçülür .

Bu yöntem, prensipte herhangi bir biyolojik molekül için kullanılabilir ve serum antijenleri ile sınırlı değildir ve yakalanan antijeni doğrudan ölçmek yerine dolaylı olarak serbest antijeni ölçmek için bir yöntem kullanmak gerekmez. Örneğin, ilgilenilen antijeni veya hedef molekülü radyoaktif olarak etiketlemek istenmiyorsa veya mümkün değilse, hedefi tanıyan iki farklı antikor mevcutsa ve hedef birden fazla sayıda sunacak kadar büyükse (örneğin bir protein) bir RIA yapılabilir. antikorlara epitoplar . Bir antikor, yukarıdaki gibi radyo-etiketlenirken diğeri modifiye edilmemiş olarak kalacaktır. RIA, "soğuk" etiketlenmemiş antikorun çözelti içindeki hedef moleküle etkileşime girmesine ve bağlanmasına izin verilmesi ile başlayacaktır. Tercihen, bu etiketlenmemiş antikor, bir agaroz boncuğuna bağlanması, bir yüzeye kaplanması, vb. Gibi bir şekilde hareketsizleştirilir . Daha sonra, "sıcak" radyo-etiketli antikorun, birinci antikor-hedef molekül kompleksi ile etkileşime girmesine izin verilir. Yoğun yıkamadan sonra, doğrudan bağlanan radyoaktif antikor miktarı ölçülür ve hedef molekül miktarı, aynı zamanda deneye tabi tutulan bir referans miktar ile karşılaştırılarak ölçülür. Bu yöntem prensipte radyoaktif olmayan sandviç ELISA yöntemine benzer.

Tarih

Bu yöntem tarafından geliştirilen Solomon Berson ve Rosalyn Sussman Yalow de Veterans Administration Hastanesi'nde de Bronx , New York. Bu devrim niteliğindeki gelişme, 1977'de Dr. Yalow'a Nobel Tıp Ödülü'nü kazandırdı ve bu ödülü kazanan ikinci kadın oldu. Dr. Yalow kabul konuşmasında, "Bizi saran birçok sorunu çözeceksek dünya, insanlarının yarısının yeteneklerini kaybetmesini kaldıramaz" dedi. Yalow, Nobel Ödülü'nü Roger Guillemin ve "beynin peptit hormonu üretimi" konusundaki araştırmalarına dayanarak ödülü kazanan Andrew Schally ile paylaştı .

Referanslar

radioimmunoassay tekniğindeki adımlar

Dış bağlantılar