Minimum inhibitör konsantrasyonu - Minimum inhibitory concentration
Olarak mikrobiyoloji , minimum inhibitör konsantrasyonu ( MIC ) görünür engeller genellikle kimyasal maddenin en düşük konsantrasyonu, bir ilaç, bir büyüme , bir bakteri ya da bakteri. MIC, mikroorganizmaya, etkilenen insana (yalnızca in vivo) ve antibiyotiğin kendisine bağlıdır. Genellikle mikrogram/mililitre (μg/mL) veya miligram/litre (mg/L) olarak ifade edilir.
MIC, artan konsantrasyonlarda in vitro kimyasal çözeltileri hazırlanarak , çözeltileri ayrı kültürlenmiş bakteri grupları ile inkübe ederek ve sonuçların agar seyreltmesi veya et suyu mikrodilüsyonu kullanılarak ölçülmesiyle belirlenir . Sonuçlar, bir kesme noktası kullanılarak duyarlı (genellikle hassas olarak adlandırılır), artan maruziyet veya belirli bir antimikrobiyal için dirençli olarak derecelendirilmiştir. Sınır değerler, ABD Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü (CLSI), İngiliz Antimikrobiyal Kemoterapi Derneği (BSAC) veya Avrupa Antimikrobiyal Duyarlılık Testi Komitesi (EUCAST) gibi bir referans kuruluşun kılavuzlarında yayınlanan değerler üzerinde mutabık kalınmıştır . Yıllar boyunca çeşitli Avrupa ülkelerinden alınan sınır değerler ile Avrupa Antimikrobiyal Duyarlılık Testi Komitesi (EUCAST) ve ABD Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü (CLSI) arasında büyük farklılıklar olmuştur.
MIC, görünür büyümeyi engellemek için gereken en düşük antibakteriyel ajan konsantrasyonu iken, minimum bakterisidal konsantrasyon (MBC), bakteri ölümüyle sonuçlanan bir antibakteriyel ajanın minimum konsantrasyonudur. MIC, MBC'ye ne kadar yakınsa, bileşik o kadar bakterisittir.
İlaç keşfindeki ilk adım , genellikle MIC'ler için bir kütüphane ilaç adayının ilgilenilen bakterilere karşı taranmasıdır. Bu nedenle, MİK'ler genellikle yeni antimikrobiyal ajanların daha büyük klinik öncesi değerlendirmeleri için başlangıç noktasıdır. Minimum inhibitör konsantrasyonunun ölçülmesinin amacı, tedavinin başarısını artırmak için antibiyotiklerin verimli bir şekilde seçilmesini sağlamaktır.
Arka plan
Tarih
Antibiyotiklerin keşfi ve ticarileştirilmesinden sonra, mikrobiyolog, farmakolog ve doktor Alexander Fleming , değerlendirme için et suyunun bulanıklığını kullanarak et suyu seyreltme tekniğini geliştirdi. Bunun genellikle minimum engelleyici konsantrasyonların kavrayış noktası olduğuna inanılmaktadır. 1980'lerin sonlarında, Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü, MIC belirleme ve klinik kullanım için yöntem ve standartları konsolide etti. Yeni antibakteriyellerin, patojenlerin ve bunların evriminin keşfedilmesinin ardından, CLSI protokolleri de bu değişikliği yansıtacak şekilde sürekli olarak güncellenmektedir. CLSI tarafından belirlenen protokoller ve parametreler Amerika Birleşik Devletleri'nde "altın standart" olarak kabul edilir ve FDA gibi düzenleyici otoriteler tarafından değerlendirme yapmak için kullanılır.
Klinik kullanım
Günümüzde MIC, antimikrobiyal duyarlılık testlerinde kullanılmaktadır. MIC, her bir antibiyotiğin yanında duyarlılık yorumu sağlanarak rapor edilir. Farklı duyarlılık yorumları şunlardır: S (Hassas), I (Orta) ve R (Dayanıklı). Bu yorumlar Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü (CLSI) tarafından oluşturulmuş ve uygulanmıştır. Kliniklerde, çoğu zaman kesin patojenler hastanın semptomlarıyla kolayca belirlenemez. Daha sonra, patojen belirlense bile , Staphylococcus aureus gibi farklı patojen serotipleri , antimikrobiyallere karşı değişen seviyelerde direnç gösterir. Bu nedenle, doğru antimikrobiyalleri reçete etmek zordur. MIC, bu gibi durumlarda, hastadan alınan patojen izolatının daha sonra tahlilde kullanılacak olan plaka veya et suyu üzerinde büyütülmesiyle belirlenir. Bu nedenle, MIC bilgisi, bir hekime reçete yazmak için değerli bilgiler sağlayacaktır. Antimikrobiyallerin doğru ve hassas kullanımı, çoklu ilaca dirençli bakteriler bağlamında da önemlidir . Bakteriler gibi mikroplar, daha önce duyarlı oldukları antimikrobiyallere karşı direnç kazanmaktadır. Uyumsuz seviyelerde antimikrobiyallerin kullanımı, bakteriyel patojenlerin direncinin yönünü ve gelişimini yönlendiren seçici baskı sağlar. Bu, antibiyotiklerin alt MİK seviyelerinde görülmüştür. Bu nedenle, antimikrobiyallerin reçetelenmesinde en iyi seçimi yapmak için MİK'nin belirlenmesi giderek daha önemli hale gelmektedir.
MİK daha kolay belirlendiği için klinik olarak MBC yerine MİK kullanılır. Mikrobiyal ölümle sonuçlanan minimum antibakteriyel konsantrasyon olan minimum bakterisidal konsantrasyon (MBC), bakterilerin yeniden kültüre edilememesi ile tanımlanır. Ek olarak, hem MIC hem de MBC konsantrasyonlarında alındığında ilaç etkinliği genellikle benzerdir çünkü konakçı bağışıklık sistemi, bakteri proliferasyonu durduğunda patojeni dışarı atabilir. MBC, MIC'den çok daha yüksek olduğunda, ilaç toksisitesi, ilacın MBC'sini hasta için zararlı hale getirir. Antimikrobiyal toksisite, immün aşırı duyarlılık ve hedef dışı toksisite gibi birçok biçimde olabilir.
yöntemler
Et suyu seyreltme deneyi
Bu testi çalıştırmak için gerekli olan üç ana reaktif vardır : ortam, bir antimikrobiyal madde ve test edilen mikrop. En yaygın olarak kullanılan besiyeri, çoğu patojenin büyümesini destekleme yeteneği ve yaygın antibiyotiklere karşı inhibitör bulunmaması nedeniyle katyon ayarlı Mueller Hinton Broth'tur. Test edilen patojene ve antibiyotiklere bağlı olarak ortam değiştirilebilir ve/veya ayarlanabilir. Antimikrobiyal konsantrasyon, stok antimikrobiyalini ortamla karıştırarak doğru konsantrasyona ayarlanır. Ayarlanan antimikrobiyal, bir gradyan elde etmek için çoklu tüplere (veya kuyucuklara) seri olarak seyreltilir . Seyreltme oranı, kesme noktasına ve uygulayıcının ihtiyaçlarına göre ayarlanabilir. Mikrop veya aşılama maddesi aynı koloni oluşturan birimden gelmeli ve doğru konsantrasyonda olmalıdır. Bu, inkübasyon süresi ve seyreltme ile ayarlanabilir. Doğrulama için, pozitif kontrol, koloni oluşturan birimleri saymak için yüz kat seyreltme ile kaplanır. Mikroplar tüpleri (veya plakayı) aşılar ve 16-20 saat inkübe edilir. MIC genellikle bulanıklık ile belirlenir.
Etest
Etestler , dünya çapında mikrobiyoloji laboratuvarlarında yaygın olarak kullanılan çok çeşitli antimikrobiyal ajanların farklı organizma gruplarına karşı minimum inhibitör konsantrasyon değerlerini belirlemek için alternatif bir yöntem olarak da kullanılabilir. bioMérieux tarafından üretilen Etests, sürekli bir konsantrasyon aralığını kapsayan, önceden tanımlanmış bir antibiyotik gradyanına sahip, kullanıma hazır, gözeneksiz bir plastik reaktif şerididir.