Mikroskop slayt - Microscope slide
Bir mikroskop lamı , nesneleri mikroskop altında incelenmek üzere tutmak için kullanılan, tipik olarak 75 x 26 mm (3 x 1 inç) ve yaklaşık 1 mm kalınlığında ince düz bir cam parçasıdır . Tipik olarak nesne slayt üzerine monte edilir (sabitlenir) ve ardından her ikisi de görüntüleme için mikroskopta birlikte yerleştirilir. Bu düzenleme, slayta monte edilmiş birkaç nesnenin hızlı bir şekilde mikroskoptan yerleştirilmesine ve çıkarılmasına, etiketlenmesine, taşınmasına ve uygun slayt kutuları veya klasörlerinde vs. saklanmasına izin verir.
Mikroskop slaytları genellikle örneğin üzerine yerleştirilen daha küçük ve daha ince bir cam levha olan bir lamel veya kapak camı ile birlikte kullanılır. Slaytlar, mikroskop sahnesinde slayt klipsleri, slayt kıskaçları veya slaytın mikroskop sahnesi üzerinde hassas, uzaktan hareketini sağlamak için kullanılan bir çapraz masa ile yerinde tutulur (otomatik/bilgisayarla çalıştırılan bir sistemde veya dokunulduğunda olduğu gibi). parmaklarla kaydırma, kontaminasyon riski veya hassasiyet eksikliği nedeniyle uygun değildir).
Tarih
Kavramının kökenli parçaları olan fildişi veya kemik şeffaf diskler arasında tutulan örnekler içeren, mika olur, slayt sahne ve hedef arasındaki boşluğa. Bu "kaydırıcılar" , Kraliyet Mikroskobik Derneği standartlaştırılmış cam mikroskop lamı tanıtana kadar Victoria İngiltere'sinde popülerdi .
Boyutlar ve türleri
Standart bir mikroskop lamı yaklaşık 75 mm x 25 mm (3" x 1") ölçülerinde ve yaklaşık 1 mm kalınlığındadır. Jeolojik kullanım için 75 x 50 mm , petrografik çalışmalar için 46 x 27 mm ve ince kesitler için 48 x 28 mm gibi çeşitli özel amaçlar için bir dizi başka boyut mevcuttur . Slaytlar genellikle sıradan camdan yapılır ve kenarları genellikle ince taşlanmış veya cilalanmıştır.
Mikroskop slaytları genellikle soda kireç camı veya borosilikat cam gibi optik kaliteli camdan yapılır , ancak özel plastikler de kullanılır. Erimiş kuvars slaytlar genellikle ultraviyole şeffaflığın önemli olduğu durumlarda, örneğin floresan mikroskopisinde kullanılır .
Düz slaytlar en yaygın olanı olsa da, birkaç özel tip vardır. Bir içbükey slayt veya boşluklu slayt , biraz daha kalın nesneleri ve sıvılar ve doku kültürleri gibi belirli numuneleri tutmak için tasarlanmış bir veya daha fazla sığ çöküntüye ("kuyular") sahiptir . Slaytlar, artırılmış güvenlik veya sağlamlık için yuvarlatılmış köşelere veya bir kayar kelepçe veya çapraz masa ile kullanım için bir kesme köşesine sahip olabilir; burada slayt, bir köşeye temas eden ve karşı köşeyi zorlayan yaylı bir kavisli kol ile sabitlenir. hareket etmeyen dik açılı bir kola karşı kaydırın. Bu sistem, bu kesik köşeleri içermeyen bir sürgü ile kullanılırsa, köşeler kırılabilir ve sürgü paramparça olabilir.
Bir şebeke kayar bir işaretlenmiş ızgara hatları (örneğin, 1 mm'lik bir ızgara) büyütme altında görülen nesnelerin boyutuna sağlar kolayca tahmin edilmesi ve sayım dakika nesneler için referans alanları içerir. Bazen ızgaranın bir karesi daha ince bir ızgaraya bölünür. Hücre sayımı için hemasitometreler gibi özel uygulamalara yönelik slaytların üst yüzeylerinde kazınmış veya topraklanmış çeşitli rezervuarlar, kanallar ve bariyerler olabilir . Çeşitli kalıcı işaretler veya maskeler , üretici tarafından genellikle PTFE gibi inert malzemelerle basılabilir , kumlanabilir veya yüzey üzerine bırakılabilir .
Hücre sayımı için bir Neubauer slayt .
|
Hücreleri saymak için kullanılan bir Neubauer slaydının ızgarasının mikroskop görüntüsü .
|
Bazı slaytların bir ucunda kurşun kalem veya tükenmez kalemle etiketlemek için buzlu veya emaye kaplı bir alan bulunur. Slaytlar, örneğin kimyasal eylemsizlik veya gelişmiş hücre yapışması için üretici tarafından uygulanan özel kaplamalara sahip olabilir . Kaplama, ince veya tozlu numuneleri tutmak için kalıcı bir elektrik yüküne sahip olabilir . Yaygın kaplamalar arasında poli-L-lisin , silanlar , epoksi reçineler ve hatta altın bulunur .
Montaj
Numunelerin mikroskop lamlarına montajı başarılı görüntüleme için genellikle kritiktir. Bu soruna son iki yüzyılda çok fazla ilgi gösterildi ve birçok uzmanlaşmış ve bazen oldukça karmaşık tekniklerle iyi gelişmiş bir alandır. Numuneler genellikle daha küçük cam lameller kullanılarak yerinde tutulur .
Lamellerin ana işlevi, preslenmiş katı numuneleri ve eşit kalınlıkta düz bir tabaka halinde şekillendirilmiş sıvı numuneleri tutmaktır. Bu gereklidir çünkü yüksek çözünürlüklü mikroskopların odaklandıkları çok dar bir bölge vardır.
Kapak camının genellikle birkaç başka işlevi vardır. Numuneyi yerinde tutar (ya lamel ağırlığı ile veya ıslak montaj durumunda yüzey gerilimi ile ) ve numuneyi tozdan ve kazara temastan korur. Mikroskobun objektif lensini numune ile temastan korur ve bunun tersi de geçerlidir; içinde yağ daldırma mikroskopi veya suya daldırma mikroskop daldırma sıvı ve numune arasında kapak kayma önler temas. Lamel, numuneyi kapatmak, numunenin dehidrasyonunu ve oksidasyonunu geciktirmek ve ayrıca kontaminasyonu önlemek için slayta yapıştırılabilir . Numuneye bağlı olarak ticari dolgu macunları, laboratuvar hazırlıkları ve hatta normal şeffaf oje dahil olmak üzere bir dizi dolgu macunu kullanılmaktadır . Canlı hücre numuneleri için kullanılabilecek solventsiz bir dolgu macunu, eşit oranlarda vazelin , lanolin ve parafin karışımı olan "valap" tır . Mikrobiyal ve hücre kültürleri , lam üzerine yerleştirilmeden önce doğrudan lamel üzerinde büyütülebilir ve örnekler lam üzerine kalıcı olarak yerleştirilebilir.
Kapak slipleri çeşitli ebat ve kalınlıklarda mevcuttur. Yanlış kalınlığın kullanılması küresel sapmaya ve çözünürlük ve görüntü yoğunluğunda azalmaya neden olabilir . Örnekleri lamelsiz görüntülemek için özel amaçlar kullanılabilir veya bir kullanıcının alternatif lamel kalınlığına uyum sağlamasına izin veren düzeltme yakaları olabilir.
kuru montaj
En basit montaj türü olan kuru montajda , nesne yalnızca kızak üzerine yerleştirilir. Numuneyi ve mikroskobun amacını korumak ve numuneyi hareketsiz ve düz bir şekilde tutmak için üstüne bir lamel yerleştirilebilir. Bu montaj, polen, tüy, kıl vb. örneklerin görüntülenmesi için başarıyla kullanılabilir. Ayrıca şeffaf membran filtrelerde yakalanan partikülleri incelemek için de kullanılır (örn. havada uçuşan toz analizinde ).
Islak montaj veya geçici montaj
Bir de , ıslak montaj , numune bir damla yerleştirilir , su ya da sürgü tarafından kapak kayma arasında düzenlenen diğer sıvı yüzey gerilimi . Bu yöntem, örneğin havuz suyunda veya diğer sıvı ortamlarda büyüyen mikroskobik organizmaları , özellikle de hareketlerini ve davranışlarını incelerken görüntülemek için yaygın olarak kullanılır . Görüntülemeyi ve organizmaların hareketlerini engelleyebilecek hava kabarcıklarının olmamasına özen gösterilmelidir. Geçici ıslak yuvaya bir örnek, hem numune montajı hem de fuksin boyaması sağlayan bir laktofuşsin yuvasıdır .
Hazır montaj veya kalıcı montaj
İçin patolojik ve biyolojik araştırmaları, örnek genellikle karmaşık maruz histolojik içerir hazırlanmasını sabitleme , çürümeye önlemek için herhangi bir su çıkarma , bunun içinde ihtiva edilen su ile değiştirilmesi parafin bir kullanılarak çok ince bölümler halinde kesilmesi, mikrotom a ilgili bölümleri yerleştirme, mikroskop lamı, belirli doku bileşenlerini ortaya çıkarmak için çeşitli boyalar kullanarak dokuyu boyamak , dokuyu şeffaf hale getirmek için temizlemek ve bir lamel ve yerleştirme ortamı ile kaplamak.
dağılmış montaj
Yayılmış montaj , konsantre bir numuneyi damıtılmış suda süspanse ederek , numuneleri bir slayt üzerine yerleştirerek ve suyun buharlaşmasına izin vererek palinolojik mikroskop slaytlarının üretimini açıklar .
Montaj ortamı
Montaj orta örnek, genel olarak bir kapak camı altında gömülü olduğu bir çözümdür. Su veya gliserol gibi basit sıvılar , montaj ortamı olarak kabul edilebilir, ancak terim genellikle kalıcı bir montajda sertleşen bileşiklere atıfta bulunur. Popüler montaj ortamları arasında Permount ve Hoyer's montaj ortamı ve alternatif bir gliserin jeli bulunur . İyi bir montaj ortamının özellikleri arasında camınkine yakın bir kırılma indeksine (1.518), numune ile reaksiyona girmeme, kristalleşmeden zaman içinde stabilite, kararma, veya numunenin hazırlandığı ortamda ( ksilen veya toluen gibi sulu veya polar olmayan) refraktif indeksi, çözünürlüğü değiştirme ve numune lekesinin solmasına veya sızmasına neden olmama.
Montaj ortamı örnekleri
Sulu
Floresansın arşivlenemediği immünofloresan sitokimyada yaygın olarak kullanılır. Geçici depolama, karanlık, nemli bir odada yapılmalıdır. Yaygın örnekler şunlardır:
- Gliserol-PBS (9:1) antikanserli, örn. aşağıdakilerden herhangi biri
- p-fenilendiamin
- propil gallat
- 1,4-Diazabisiklo (2,2,2)-oktan (DABCO) (çok popüler)
- Askorbik asit
- Mowiol veya Gelvatol
- Jelatin
- Montaj
- Vectashield
- Altını uzat
- CyGEL / CyGEL Sustain (canlı, sabitlenmemiş hücreleri ve organizmaları hareketsiz hale getirmek için)
susuz
Kalıcı bir montaj gerektiğinde kullanılır
- Permount (toluen ve a-pinen, b-pinen, dipenten, b-phellandrene polimeri)
- kanada balzamı
- DPX ( D istrene 80 - ticari bir polistiren , bir p lasticizer örneğin dibütil ftalat ve ksilen )
- DPX yeni ( ksilenli ancak kanserojen dibütil ftalat içermeyen )
- Entellan (toluen ile)
- Entellan yeni
- Hempstead Halide Hoyer's Medium (%60 Kloral içeren , ancak bilinen kanserojen içermeyen geleneksel Hoyer's besiyerinin tescilli bir formülasyonu )
- Neo-Mount (alifatik neo-clear ile uyumludur ancak ksilen gibi aromatik solventlerle uyumlu değildir)
"Montaj" kelimesinin diğer türleri/anlamları ile zıtlık
Cam lameller için gerekli olan montajın aksine, müzelerdeki cam kaplarda daha hacimli numune muhafazası için biraz benzer montaj yapılabilir. Bununla birlikte , biyolojik veya biyolojik olmayan malzemeler için olabilen ve ayrıca "sıcak" (basınçlı) ve "soğuk" (dökülebilir) tip montaj işlemlerine ayrılan numune hazırlama için tamamen farklı bir montaj türü yapılır . "Montaj" olarak adlandırılsa da, histolojiye yerleştirmeye daha yakındır ve yukarıda açıklanan montajla karıştırılmamalıdır. Diğer alanlarda montaj teriminin çok sayıda başka anlamı vardır.