Kolorimetri (kimyasal yöntem) - Colorimetry (chemical method)
Olarak fiziksel ve analitik kimya , kolorimetre veya renkölçüm renkli bileşiklerin konsantrasyonunu belirlemek için kullanılan bir tekniktir çözeltisi . Bir renk ölçer bir ışık belli bir dalga boyunda absorbe oranını ölçmek yoluyla bir çözeltinin konsantrasyonunu test etmek için kullanılan bir cihazdır (ile karıştırılmamalıdır tristimülüs kolorimetre , genel olarak renk ölçümü için kullanılır).
Kolorimetreyi kullanmak için, bilinen konsantrasyonun bir kontrolü veya referansı dahil olmak üzere farklı çözümler yapılmalıdır. Görsel bir kolorimetre ile, örneğin gösterilen Duboscq kolorimetre ile, çözeltilerden geçen ışık yolunun uzunluğu değiştirilebilirken, bunlardan geçen filtrelenmiş ışık görsel bir eşleşme için karşılaştırılır. Renkler eşleştiğinde konsantrasyon çarpı yol uzunluğu eşit olarak alınır, bu nedenle bilinmeyenin konsantrasyonu basit oranlarla belirlenebilir. Nessler tüpleri aynı prensipte çalışır.
Elektronik otomatik kolorimetreler de vardır; bu makineler kullanılmadan önce kontrol solüsyonu içeren bir küvet ile kalibre edilmelidir . Bir numunenin konsantrasyonu, Beer-Lambert yasası kullanılarak numuneden geçmeden önce ve sonra ışığın yoğunluğundan hesaplanabilir . 1960'larda fotoelektrik analizörler hakim oldu.
Kolorimetre tarafından iletilen ışığın dalga boyunun, ölçülen madde tarafından emilen ışıkla aynı olması gerektiğinden, kolorimetre için seçilen filtrenin rengi veya dalga boyu son derece önemlidir. Örneğin, sıvı maviyse kolorimetre üzerindeki filtre kırmızıya ayarlanabilir.
Absorpsiyon kolorimetresi
Bir renk ölçer bir ışık belli bir dalga boyunda absorbe oranını ölçmek yoluyla bir çözeltinin konsantrasyonunu test etmek için kullanılan bir cihazdır. Bu cihazı kullanmak için farklı solüsyonlar yapılmalı ve önce bir kontrol (genellikle damıtılmış su ve başka bir solüsyon karışımı ) bir küvete doldurulur ve makineyi kalibre etmek için bir kolorimetre içine yerleştirilir. Ancak cihaz kalibre edildikten sonra diğer çözeltilerin yoğunluklarını ve/veya konsantrasyonlarını bulmak için kullanabilirsiniz. Bunu, diğer solüsyonlarla doldurulmuş küvetler dışında kalibrasyonu tekrarlayarak yaparsınız. Sıvı mavi ise kolorimetre üzerindeki filtre kırmızıya ayarlanmalıdır. Kolorimetre tarafından iletilen ışığın dalga boyunun, madde tarafından emilen ışıkla aynı olması gerektiğinden, kolorimetre için başlangıçta seçilen filtrenin boyutu son derece önemlidir.
kolorimetrik testler
Kolorimetrik testler, analitin varlığında ölçülebilir bir renk değişikliğine uğrayan reaktifleri kullanır . Enzimlerin, spesifik bileşiklerin, antikorların, hormonların ve daha birçok analitin varlığını test etmek için biyokimyada yaygın olarak kullanılırlar. Örneğin,
- para-Nitrofenilfosfat , alkalin fosfataz enzimi tarafından sarı bir ürüne dönüştürülür .
- Coomassie Blue , proteinlere bağlandıktan sonra, nicel dozaja izin veren bir spektrum kaymasına neden olur. Benzer bir kolorimetrik tahlil, Bisinkoninik asit tahlili , protein konsantrasyonunu belirlemek için bir kimyasal reaksiyon kullanır.
- Enzim bağlantılı immünolojik testler, antijenleri tespit etmek için enzim kompleksli antikorlar kullanır. Antikorun bağlanması genellikle TMB gibi reaktiflerin renk değişikliğinden anlaşılır .
Ayrıca bakınız
Referanslar
- ^ Housecroft, Catherine; Memur, Edwin (2006). Kimya: organik, inorganik ve fiziksel kimyaya giriş . Pearson Eğitimi. s. 349–353. ISBN'si 978-0-13-127567-6.
- ^ Louis Rosenfeld (1999). Dört yüzyıllık klinik kimya . CRC Basın. s. 255–258. ISBN'si 978-90-5699-645-1.